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番紅-固綠染色（軟骨）實(shí)驗(yàn)代測(cè)

在涉及關(guān)節(jié)軟骨及軟骨下骨的形態(tài)學(xué)研究中，常需聯(lián)合使用多種染料以顯示其組織學(xué)結(jié)構(gòu)。其中，起源于上世紀(jì)60年代的番紅O（safranin O）-固綠（fast green）染色因可以直觀反映關(guān)節(jié)軟骨、軟骨下骨和骨組織的結(jié)構(gòu)而備受青睞。

服務(wù)說(shuō)明

番紅固綠染色實(shí)驗(yàn)步驟

1、石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無(wú)水乙醇Ⅰ10min-無(wú)水乙醇Ⅱ10min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸餾水洗。

2、番紅染色：切片入1%番紅染液染色1-2h。自來(lái)水稍洗，洗去多余染料。

3、脫色：入50%，70%，80%梯度酒精脫色各5-10s。

4、固綠染色：切片入0.5%固綠染液中染色5-10s。無(wú)水乙醇I中脫色30s，無(wú)水乙醇II中脫色1min。

5、封片：切片于60℃烤箱烤干后于二甲苯透明5min，中性樹膠封片。

6、顯微鏡鏡檢，圖像采集分析。

番紅-固綠染色（軟骨）實(shí)驗(yàn)代測(cè)

注意事項(xiàng)

1、 片子染色不好需要重新染色時(shí)，可以用自來(lái)水浸泡去除固綠顏色，鹽酸酒精浸泡去除番紅顏色。
2、 番紅鮮紅色除了軟骨外其他有些地方的紅色也較深。一旦番紅著色深后再染固綠染不上，需進(jìn)將番紅紅色全部脫掉后重新染方可。
3、 染色時(shí)間稍有差異紅色和綠色的差異就會(huì)很大，要注意鏡下控制兩種顏色的程度。
4、 番紅染次數(shù)多了會(huì)產(chǎn)生沉淀且不易著色，需及時(shí)更換染液。