PRODUCT CLASSIFICATION
產(chǎn)品分類TECHNICAL ARTICLES
相關(guān)文章產(chǎn)品展示/ Product display
RIPA組織/細胞裂解液,是一種主要用于從動物組織和動物細胞中抽取的可溶性蛋白的試劑。
聯(lián)系電話:13764793648
RIPA組織/細胞裂解液
【產(chǎn)品名稱】 :RIPA裂解液(組織/細胞)
【產(chǎn)品規(guī)格】 :20ml /100ml
【儲存條件】 :RIPA裂解液4℃保存,PMSF -20℃保存
【有效期】 :12個月
【產(chǎn)品簡介】 :
RIPA裂解液(組織/細胞)是一種主要用于從動物組織和動物細胞中抽取的可溶性蛋白的試劑。
RIPA 組織/細胞裂解液是利用表面活性劑等來裂解細胞膜(包括核膜)。本試劑提取的蛋白為可溶性總蛋白。
本產(chǎn)品僅供科研實驗用,不做其它用途!
【使用說明】 :
如發(fā)現(xiàn)RIPA有沉淀,請放室溫半小時或者常溫水浴使沉淀溶解。
根據(jù)使用量,取每1mL RIPA加入10uL PMSF,使PMSF的最終濃度為1mM,混勻備用(PMSF現(xiàn)用現(xiàn)加)。
1、樣品前處理:
a)對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 μL裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。
b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,按照6孔板每孔細胞量加入150-250uL裂解液的比例加入裂解液,用手指輕彈懸浮細胞以充分裂解。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成50-100萬細胞/管,然后再裂解。
c)對于組織樣品:把組織-剪切成細小的碎片。按照每20mg組織加入150-250 μL裂解液的比例加入裂解液(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量) 。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
2、后處理:
將裂解后的樣品10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting和免疫沉淀等操作。
【注意事項】 :
本試劑為強烈型裂解液,可以提取核蛋白,但在提取核蛋白的同時,也會將基因組一并釋放出來,若細胞量多會造成細胞裂解液粘稠:此時可以直接加入蛋白上樣緩沖液,煮沸再離心,離心后直接上樣電泳;若想測定濃度,可加入少量 SDS(1%),煮沸后離心測濃度。本系列蛋白提取試劑所提取的蛋白由于含有去污劑,所以不適合使用Bradford 蛋白濃度測定試劑盒,請選擇BCA法或者Lowry法檢測蛋白濃度。
如果需要檢測和基因組結(jié)合特別緊密的蛋白,則可以通過超聲處理打碎打散粘稠狀物,隨后離心取上清用于后續(xù)實驗。
RIPA組織/細胞裂解液
郵箱:1170233632@qq.com
傳真:021-51870610
地址:上海市顧戴路2988號B幢7樓