夜夜添无码试看一区二区三区,美女胸大18禁止网站,国产日韩一区二区,玖玖精品国产,xvideos国产在线视频

熱門搜索: 抗血漿鑒別試劑盒 甲種胎兒球蛋白抗原 重組核心鏈霉親和素 2(不帶標(biāo)簽) 重組鏈霉親和素(r-ScSA)(NC膜專用) 重組鏈霉親和素(帶His標(biāo)簽) 羊抗人視-黃醇結(jié)合蛋白多克隆抗體 大鼠白細(xì)胞介素1β(IL-1β)試劑盒(ELISA) 人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子ELISA試劑盒 1%豚鼠紅細(xì)胞 2%雞紅細(xì)胞 1%雞紅細(xì)胞 重組人線粒體核糖體蛋白S2(MRPS2) 重組人蛋白酶體激活物亞基1(PSME1)蛋白 重組人肝癌衍生生長(zhǎng)因子相關(guān)蛋白3 重組人FAM83A蛋白 重組人ER膜蛋白復(fù)合物亞基8蛋白(COX4NB)

PRODUCT CLASSIFICATION

產(chǎn)品分類

技術(shù)文章/ Technical Articles

您的位置:首頁(yè)  /  技術(shù)文章  /  上海信帆生物:溶血空斑形成試驗(yàn)

上海信帆生物:溶血空斑形成試驗(yàn)

更新時(shí)間:2016-05-13      瀏覽次數(shù):1220

溶血空斑形成試驗(yàn)是一種體外檢測(cè)單個(gè)抗體形成細(xì)胞(漿細(xì)胞)的方法,故又稱體外抗體形成細(xì)胞(Plaque Forming Cell, PFC)測(cè)定技術(shù)。此項(xiàng)技術(shù)不僅可以作為免疫基本理論研究的有力工具,廣泛地用于檢測(cè)產(chǎn)生IgM類型(包括其它各類免疫球蛋白及其亞類)的抗體形成細(xì)胞,它還可作為研究篩選抗腫瘤新藥以及研究中藥對(duì)抗體免疫功能影響的免疫學(xué)指標(biāo)。 
一、原理: 
  溶血空斑形成試驗(yàn)的基本原理是將經(jīng)綿羊紅細(xì)胞免疫小鼠的脾細(xì)胞與一定量的綿羊紅細(xì)胞混合,在補(bǔ)體參與下,使抗體形成細(xì)胞周圍那些受到抗體分子致敏的綿羊紅細(xì)胞溶解,形成肉眼可見的溶血空斑。根據(jù)所操作的方法不同可分為直接溶血空斑試驗(yàn),間接溶血空斑試驗(yàn),瓊脂固相法,小室液相法,單細(xì)胞層法等等。下面介紹直接溶血空斑形成試驗(yàn)。 
  二、操作步驟: 
  1. 底層瓊脂平皿的制備:將1.4%瓊脂加熱融化后傾注于平皿內(nèi),每個(gè)平皿6ml,凝固后置濕盒37℃?zhèn)溆谩?nbsp;
2. 0.7%瓊脂加熱融化后加入華氏管內(nèi),每管2ml,47~49℃水浴保溫備用。 
  3. 免疫小鼠脾細(xì)胞懸液制備:用4×103 個(gè)綿羊紅細(xì)胞(SRBC)鹽水懸液腹腔免疫小鼠,對(duì)照為等量生理鹽水。4天后,小鼠拉脫頸椎處死,取出脾臟,用RPMI164。洗一次后置平皿中不銹鋼篩網(wǎng)上,用注射器針芯研磨成懸液,洗滌兩次,調(diào)整細(xì)胞數(shù)為3~8×106/ml。臺(tái)盼蘭染色查活細(xì)胞數(shù)應(yīng)大于90%。置4℃冰箱備用。 
  4. 試驗(yàn)平皿的制備:依次將預(yù)溫40℃左右的25%SRBC、牼-SRBC吸收的滅活胎牛血清以及保存于4℃的脾細(xì)胞懸液各0.1ml加入預(yù)熱47~49℃的含0.7%瓊脂的華氏管中,迅速混勻,立即傾注于鋪有底層瓊脂的平皿內(nèi),凝固后,置37℃孵育1小時(shí)。 
5. 加入1∶5~1∶10稀釋的新鮮豚鼠血清0.5~1.0ml,使其均勻覆蓋表面,再次置37℃溫育30分鐘,即可用肉眼或借助于放大鏡進(jìn)行空斑計(jì)數(shù)。 
  三、試劑和器材 
  ㈠ 試劑 
  1. 1.4%瓊脂:用pH7.4PBS配制。 
  2. 0.7%瓊脂:用pH7.4PBS配制 
3. 25%SRBC鹽水懸液 
4. RPMI1640 
5. 胎牛血清,56℃30分鐘滅活,并經(jīng)SRBC吸收 
  6. 補(bǔ)體:新鮮豚鼠血清,用前經(jīng)SRBC吸收后,用RPMI1640稀釋。 
 ?、?器材:玻璃平皿7×1.5cm,三角燒瓶,水浴箱(47~49℃),華氏管,1ml注射器,不銹鋼篩網(wǎng),青霉素瓶,離心管,不同規(guī)格加樣器等。 
四、注意事項(xiàng): 
  1. 0.7%瓊脂必須置47~49℃水浴融態(tài)保溫。如溫度過高會(huì)導(dǎo)致SRBC溶血或所加入脾細(xì)胞的死亡。溫度過低則在操作過程中瓊脂發(fā)生凝固,影響上層瓊脂平板的制備 
2. 離體的脾細(xì)胞應(yīng)置4℃冰箱保存,防止抗體分泌和細(xì)胞死亡。 
  3. 在制備試驗(yàn)平皿時(shí),對(duì)于所有玻璃器皿和各種試劑,均需預(yù)溫,牭1各種試劑加入華氏管后,應(yīng)與0.7%瓊脂迅速充分混勻,然后立即傾倒于底層瓊脂上,并避免傾入氣泡。 
  4. 加入的補(bǔ)體應(yīng)均勻覆蓋于表層瓊脂上。 
  5. 制備底層平皿和試驗(yàn)平皿時(shí),均須將平皿置于水平臺(tái)上,以保證瓊脂面鋪平。

elisa試劑盒,進(jìn)口elisa試劑盒,國(guó)產(chǎn)elisa試劑盒,elisa試劑盒,明膠酶譜法試劑盒,白介素Elisa試劑盒,睪酮檢測(cè)試劑盒,雌二醇檢測(cè)試劑盒,進(jìn)口elisa試劑盒 -上海信帆生物科技有限公司 

微信掃一掃

郵箱:1170233632@qq.com

傳真:021-51870610

地址:上海市顧戴路2988號(hào)B幢7樓

Copyright © 2024 上海信帆生物科技有限公司版權(quán)所有   備案號(hào):滬ICP備13019554號(hào)-1    技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)

TEL:13764793648

掃碼加微信