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上海信帆:結(jié)締組織染色的方法和步驟

更新時間:2015-08-27      瀏覽次數(shù):1411

上海信帆生物代理銷售結(jié)締組織染色液,可代做結(jié)締組織染色實驗,歡迎。

一般所說的結(jié)締組織是指纖維性結(jié)締組織而言,其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是細(xì)胞間質(zhì)內(nèi)基質(zhì)外含有較多的纖維成分,主要是膠原纖維、彈性纖維和網(wǎng)狀纖維,我們僅簡述這三種纖維的常見染色方法。
(1)Mallory三色染色法:常用于判定多種組織、器官的病變程度及修復(fù)情況,區(qū)分腫瘤組織中的纖維成分與平滑肌。
染色步驟:
①中性甲醛液固定組織,石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水。
②重鉻酸鉀液10min。
③蒸餾水沖洗2min,蒸餾水2次。
④酸性復(fù)紅液2min,蒸餾水稍洗。
⑤苯胺藍(lán)液20min,95%乙醇快速分化。
⑥直接用無水乙醇脫水,二甲苯透明,中性樹膠封固。
結(jié)果判定:膠原和網(wǎng)狀纖維呈藍(lán)色。
(2)Van Gieson苦味酸酸性復(fù)紅法:可以顯示組織、器官的損傷、修復(fù)及硬化情況,特別是用于鑒別腫瘤組織中的膠原纖維與平滑肌纖維,可為診斷提供重要依據(jù)。
染色步驟:
①組織切片按常規(guī)脫蠟水洗。
②用Weigert蘇木素液染細(xì)胞核5~l0 min。
③自來水充分洗滌數(shù)分鐘。
④用顯微鏡檢查細(xì)胞核的著色程度,過深可用0.5%鹽酸乙醇分化。
⑤自來水洗至變藍(lán);用蒸餾水洗。
⑥用Van Gieson液染1~5 min。
⑦傾去染液,直接用95%乙醇分化和脫水。
⑧無水乙醇脫水,二甲苯透明,中性樹膠封固。
結(jié)果判定: 膠原纖維呈深粉紅色,肌纖維、胞漿及紅細(xì)胞黃色,細(xì)胞核呈棕黑色或蘭黑色。

(3)網(wǎng)狀纖維染色-Wider染色法:可以用來顯示病變組織網(wǎng)狀支架的破壞情況。特別是在腫瘤病理診斷中,網(wǎng)狀纖維染色對于鑒別來源于上皮組織和間葉組織的惡性腫瘤具有重要價值。
染色步驟:
①組織切片脫蠟至水。
10%②磷鉬酸,2~5min。蒸餾水沖洗,5min。
1%③硝酸鈾,5s。蒸餾水沖洗,10s。
④氧化銀溶液,5~10min。
95%⑤乙醇速洗,1~2s。
⑥還原液還原,1~2s。蒸餾水沖洗,2min。
0.2%⑦氯化金調(diào)色,2~20s。蒸餾水沖洗,5min。
5%⑧次亞硫酸鈉,2min。蒸餾水沖洗,2min。
⑨核固紅染細(xì)胞核,5~10min。水稍洗。
⑩常規(guī)無水乙醇脫水、二甲苯透明、中性樹膠封固。
結(jié)果判定:網(wǎng)狀纖維呈黑色、細(xì)胞核呈紅色。

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