基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)是鋅鈣依賴性蛋白水解酶家族成員,可分解細胞外基質(zhì)(ECM),在不同的亞細胞環(huán)境中,參與多種分子的加工過程。MMPs在眾多生理學進程中發(fā)揮重要功能,例如胚胎發(fā)育、形態(tài)發(fā)生、繁殖以及組織重構。也參與以及自身免疫疾病,例如、和。新合成的MMPs的量主要在轉錄水平被調(diào)節(jié),已經(jīng)存在的MMPs的蛋白水解活性,不僅受控于酶原的活性,也受控于內(nèi)源性抑制劑對酶活性的抑制,例如α2-巨球蛋白,以及金屬蛋白酶組織抑制劑(TIMPs)。
基質(zhì)金屬蛋白酶(mmp2/9)試劑盒以HRP標記的鏈霉親和素復合物(HRPStreptavidinConjugate,HRP-SA)為基礎,可用于檢測細胞、組織內(nèi)的特異性抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強、定性定位準確、背景清晰。在所用的一抗與相應靶抗原結合后,用生物化二抗與一抗特異性結合,加入HRP-SA,形成抗原—特異一抗—生物素化二抗—HRP-SA復合物,顯微鏡下觀察成像。
基質(zhì)金屬蛋白酶(mmp2/9)試劑盒的操作注意事項:
1.試劑盒的操作方法同WB是一樣的
2.試劑盒的陽性對照,是選用全血做對照,具體如下操作如下:
陽性對照(可選步驟):可取人、小鼠、大鼠或兔100μl全血與100μl2×SDS-PAGEnon-reducingbuffer等體積混合,取5-15μl上樣。
3.在操作孵育的時候,建議孵育5小時
4.本試劑盒可以檢測MMP2/9活性,同時可以測定PROMMP2/9,可根據(jù)實驗需要,選取觀察。
5.本試劑盒上樣蛋白建議20ug。