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產(chǎn)品分類透明質(zhì)酸A使用什么檢測方法更-上海信帆生物
透明質(zhì)酸A在大多數(shù)情況下都是選擇用放射免疫的方法來檢測,包括研究上也經(jīng)常選擇使用放免的方法來測透明質(zhì)酸A,那么放免的原理具體是什么,檢測靈敏度是多少?上海信帆為您答疑解惑?
透明質(zhì)酸(Hyaluronic Acid, HA)是一種廣泛存在于細(xì)胞外基質(zhì)中的高分子多糖,主要由肝內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行降解。肝組織正常結(jié)構(gòu)受到損傷時,一方面 HA 的合成增加,另一方面肝臟對 HA 的降解能力下降,導(dǎo)致血清中 HA 水平明顯增高,并且增高的程度與肝組織炎癥及纖維化程度呈正相關(guān)。
急性肝炎、慢性活動性肝炎、肝硬化以及肝癌都導(dǎo)致血清 HA 水平增高,某些惡性腫瘤、肺心病患者的血清 HA 水平也會增高。慢性肝炎在用干擾素或激素進(jìn)行治療時,伴有血清 HA 水平下調(diào)。胚胎兒血清 HA *,新生兒血清 HA 仍維持在較高水平,隨著年齡增長血清 HA 逐漸降低,到中、老年又略有升高。
血清 HA 水平是反映肝纖維化的重要指標(biāo),也可用于抗纖維化藥物治療時的動態(tài)觀察。
本方法采用競爭放射免疫分析法,即標(biāo)準(zhǔn)或待測樣品中的 HA 和125I-HA 共同與*的透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(Hyaluronic Acid BindingProtein, HABP)在適宜的條件下進(jìn)行競爭性結(jié)合反應(yīng)。一部分 125I-HA125與 HABP 結(jié)合形成復(fù)合物,而另一部分呈游離狀態(tài)。 I-HA 與 HABP
結(jié)合的比例取決于標(biāo)準(zhǔn)或待測樣品中非標(biāo)記 HA 的含量,非標(biāo)記 HA的含量越高,125I-HA 與 HABP 形成的復(fù)合物越少。HA-HABP 復(fù)合物與 HABP 抗體和第二抗體形成交聯(lián)的聚合物沉淀下來,測定沉淀物的放射性計(jì)數(shù)。經(jīng)過適當(dāng)?shù)臄?shù)據(jù)處理后可獲得標(biāo)準(zhǔn)曲線,從標(biāo)準(zhǔn)曲線
上查出被測樣品的 HA 含量(數(shù)據(jù)可由計(jì)算機(jī)自動處理)。
【適用儀器】
適用于各類γ-放射免疫分析儀。
【血樣處理】
取靜脈血分離血清,48 小時內(nèi)測量可在 2~8℃密閉保存;超過 48
小時-20℃密閉冷凍保存,至少穩(wěn)定 2 個月,但要避免反復(fù)凍融。
【本藥盒的主要技術(shù)指標(biāo) 】
1. 測定范圍:25~800ng/ml;
2. 靈敏度:5.5ng/ml;
3. 精密度:批內(nèi)變異 CV<10%;批間變異 CV<15%。
【注意事項(xiàng)】收到藥盒后盡快存放在 2-8℃保存,使用前應(yīng)平衡至室
溫,加試劑前必須搖勻。
1. 操作前請仔細(xì)閱讀說明書,不同批號的試劑不得混用。
2. 加樣操作應(yīng)快速準(zhǔn)確手法一致,盡量縮短整個加樣時間。一
批測定中管數(shù)不宜過多,以加入 HABP 前后管相差在 5 分鐘
內(nèi)為宜,嚴(yán)格控制每步反應(yīng)的時間和溫度。
3. 加樣頭不可混用,以免交叉污染。
4. 加標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控或樣品時注意將樣本加到試管底部;加標(biāo)記
物時加樣頭不要碰到液面;加抗體時加樣頭應(yīng)在液面之上約
1cm 以免交叉污染。
5. 溫浴之前應(yīng)充分混合均勻
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