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產(chǎn)品分類放免試劑盒抗原的標記方法,信帆生物為您答疑解惑!
抗原的標記
1.放射性同位素的選擇 選擇同位素的原則。
⑴ 定方法簡單、經(jīng)濟、便于推廣應用。
⑵ 易于防護。
⑶ 同位素與標記物結(jié)合好,不易從標記物上脫落。
⑷ 對標記物不引起輻射損傷,使蛋白變性。
⑸ 具有較高的計數(shù)效率。
目前常用的同位素有3H、125 I,其它還有14C、35S和32P等。① 3H 因所有的有機化合物中均含有氫,用3H來置換氫,不至于影響其原有化合物的化學性質(zhì)。3H的半衰期長,是一個弱 衰變,能量低,便于防護。一次標記可以使用較長時間,采用閃爍儀測量,測量效力可達60%。3H標記要求條件較高,一般需由專門機構(gòu)來承擔,不易推廣;② 125I 碘標記的化合物比度高,標記方法簡便,而且標記物可在碘化na晶體﹟型計數(shù)器上直接測定。125I發(fā)射 射線,含有酪氨酸的蛋白質(zhì)和多肽均可用放射性I標記。目前,連接標記技術(shù)已有相當發(fā)展,致使許多非蛋白質(zhì)和多肽的半抗原也可以用碘來標記。另外碘的放射能量較大,半衰期也較短。
雖然125I的放射比活性僅為131I的13%,但125I的半衰期較131I長,同位素豐度大,輻射損傷小,計數(shù)效率也較高,因此125I比131I更為常用。
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